檢測原理

本品系用特異性抗 Cry1Ab/1Ac 單抗包被的微孔板和酶標(biāo)記抗 Cry1Ab/1Ac 單抗，雙抗體夾心法檢測 Cry1Ab/1Ac 基因表達產(chǎn)物，可以高靈敏度和特異性的檢測轉(zhuǎn)基因植物中的 Bt-Cry1Ab/1Ac 蛋白。

組份（規(guī)格）

預(yù)包被板（抗 Cry1Ab/1Ac 單抗）      12 孔×8

Cry1Ab/1Ac 酶標(biāo)抗體                 12 ml×1 瓶

20×濃縮洗滌液                      30 ml×1 瓶

5×抽提液/稀釋緩沖液                30 ml×1 瓶

底物液 A                            7 ml×1 瓶

底物液 B                            7 ml×1 瓶

終止液                              7 ml×1 瓶

使用說明書                          1 份

0ppb 陰性對照                       1ml

4 個不同濃度的標(biāo)樣：           

0.5 ppb 1.0 ppb 2.0 ppb 4.0 ppb          各 1ml

試劑準(zhǔn)備

試劑盒中的 20×濃縮洗滌液 30 ml 加 570 ml 滅菌 ddH2O 溶解稀釋至 1×洗滌液，5×抽提液（30 ml）加 120 ml ddH2O 稀釋至 1×抽提液，4℃存放備用。

樣品準(zhǔn)備

稱取約 20 mg 葉片，加 0.5 ml 1×抽提液（使用前 30 min 放置室溫）研磨至勻漿，室溫放置 30 min，測定前把樣品上清液稀釋 5-20 倍。

測定莖干和胚乳中的 Bt 蛋白時，樣品稱取約 40 mg，加 1 ml 1×抽提液研磨。

ELISA 反應(yīng)

1. 依次加 100 μl 陰性對照，標(biāo)準(zhǔn)品（4 個不同濃度的標(biāo)樣：0.5 ppb，1.0 ppb，2.0 ppb, 4.0 ppb）和待測樣品至 96 孔板；

2. 用封口膜蓋住 96 孔板，快速搖動平板混勻樣品；

3. 37℃恒溫箱孵育 30 min；

4. 倒掉 96 孔板中液體，每孔加入 1×洗滌液 250 μl 洗滌微孔板，洗板 5 次，用吸水紙拍干；

5. 按順序在每個小孔中加入 100 μl Cry1Ab/1Ac 酶標(biāo)抗體，然后重復(fù)步驟 2；

6. 37 ℃恒溫箱孵育 30 min；

7. 倒掉 96 孔板中液體，每孔加入 1×洗滌液 250 μl 洗滌微孔板，洗板 5 次，用吸水紙拍干；

8. 依次加入 50 μl 底物 A 液，50 μl 底物 B 液，重復(fù)步驟 2；

9. 室溫（20-25℃）避光孵育 10 min，加 50 μl 終止液，充分混勻終止反應(yīng)，15min 以內(nèi)在酶標(biāo)儀上讀取結(jié)果。 在 450 nm 為主波長，630 nm 為次波長（或單波長 450 nm）下，用空白孔校零，再讀取各孔 OD 值。

使用注意事項

1. 測定中需使用的所有試劑和 96 孔板提前 30 min 放置室溫溫育（否則會影響試驗準(zhǔn)確性），注意12 連管必須溫育后再從平板上取下，未使用完的預(yù)包被板條應(yīng)置于有干燥劑的封口袋中密封保存；

2. 試劑使用前應(yīng)充分搖勻；

3. 搖動平板混勻時注意避免樣品之間交叉污染；

4. 使用洗滌液漂洗時，洗滌液需要填滿每個小孔，進行充分漂洗；

5. 研磨好的樣品如果不能一次全部測量，可以暫時在 4 ℃避光保存，但是最好在 24 h 內(nèi)測定；

6. 結(jié)果判讀請在反應(yīng)終止后 15 min 內(nèi)完成。

Bt 蛋白濃度計算公式

Bt 蛋白濃度（μg/g）=

儲存條件及有效期

試劑盒儲存于 2-8℃，切勿凍存；未開封試劑盒有效期 12 個月，開封后 3 個月內(nèi)用完。（見包裝盒上標(biāo)簽有效期）

技術(shù)參數(shù)

本品適用于玉米、棉花、大豆以及其各種農(nóng)作物中轉(zhuǎn)基因成分的快速定量測試。

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儀器名稱	型號	產(chǎn)品圖片	型號間技術(shù)區(qū)別
轉(zhuǎn)基因品種快速檢測儀	TPJY-1		小巧輕便易攜帶：裝備輕巧易攜帶，把實驗室裝進背包里，搬進農(nóng)田。 快速檢測、精準(zhǔn)鑒定：相較于傳統(tǒng)實驗室基因檢測，新型轉(zhuǎn)基因快速檢測儀通常只需要在30分鐘以內(nèi)，便可完成基因鑒定，并可對具體哪一種基因品種進行精準(zhǔn)鑒定。大大縮短了檢測過程的時間。 配置標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范：基于專業(yè)實驗室基礎(chǔ)，新型轉(zhuǎn)基因快速檢測儀，采用專用的試劑盒（含快速提取試劑+PCR反應(yīng)試劑），專用PCR儀（16通道）。 應(yīng)用場景廣泛：一臺多用，除了適用于玉米、大豆中轉(zhuǎn)基因成分篩查及轉(zhuǎn)化體快速鑒定，還可作為日?？蒲袑嶒?、實時熒光定量PCR使用，比常規(guī)PCR儀檢測速度更快，操作更簡單，節(jié)省一半以上科研時間。 配置清單：轉(zhuǎn)基因品種快速檢測儀（含配套前處理設(shè)備）1套，DNA快速提取試劑1瓶，專用試劑盒12盒。
轉(zhuǎn)基因快速檢測試紙(抗蟲)	BtCry1Ab/1Ac		用于快速檢測水稻、小麥、玉米、棉花等種子或植物葉片等樣品中的轉(zhuǎn)基因BtCry1Ab/1Ac，BtCry2A，BtCry1c靈敏度為1%，過程只需要10-15分鐘。
	BtCry2A
	BtCry1c
轉(zhuǎn)基因快速檢測試紙(抗除草劑)	EPSPSCP4		本產(chǎn)品用于快速檢測植物谷物散糧等樣品中的轉(zhuǎn)基因CP4EPSPS，靈敏度為0.2%，整個檢測過程只需要10分鐘，適各類企業(yè)及檢測機構(gòu)。
	PATPAT
	BAR(進口)
	BAR(國產(chǎn))
轉(zhuǎn)基因試劑盒(抗蟲)	BtCry1Ab/1Ac		可以高靈敏度和特異性的檢測水稻、小麥、玉米、棉花等種子或植物葉片等樣品中的轉(zhuǎn)基因BtCry1Ab/1Ac，BtCry2A，BtCry1c蛋白，試劑盒96孔。
	BtCry2A
	BtCry1c

更新日期：2026-1-24